人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆中戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)水平,感染人的血液学诊断。
实验原理:
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)的存在与否。
试剂盒组成:
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 试剂盒组成  | 
 48孔配置  | 
 96孔配置  | 
 保存  | 
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 说明书  | 
 1份  | 
 1份  | 
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 封板膜  | 
 2片(48)  | 
 2片(96)  | 
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 密封袋  | 
 1个  | 
 1个  | 
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 酶标包被板  | 
 1×48  | 
 1×96  | 
 2  | 
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 阴性对照  | 
 0.5ml×1瓶  | 
 0.5ml×1瓶  | 
 2  | 
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 阳性对照  | 
 0.5ml×1瓶  | 
 0.5ml×1瓶  | 
 2  | 
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 酶标试剂  | 
 3 ml×1瓶  | 
 6 ml×1瓶  | 
 2  | 
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 样品稀释液  | 
 3 ml×1瓶  | 
 6 ml×1瓶  | 
 2  | 
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 显色剂A液  | 
 3 ml×1瓶  | 
 6 ml×1瓶  | 
 2  | 
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 显色剂B液  | 
 3 ml×1瓶  | 
 6 ml×1瓶  | 
 2  | 
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 终止液  | 
 3ml×1瓶  | 
 6ml×1瓶  | 
 2  | 
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 浓缩洗涤液  | 
, 
 (20ml×20倍)×1瓶  | 
 (20ml×30倍)×1瓶  | 
 2  | 
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
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